MHonArc test archive
[Prev][Next][Index][Thread]

[db-006] 3P082 : 同一サイズの Immunogold による電顕免疫二重染色法

##Begin
#Z 3P082
#A 同一サイズの Immunogold による電顕免疫二重染色法
#B A double staining method with a single immunogoldreagent for
 electron microscopic immunocytochemistry.
#E1 藤森／修
#F1 ふじもり／おさむ
#G1 Fujimori/Osamu
#J1 名古屋市立大学医学部解剖学第二講座
#K1 なごや しりつ だいがく いがくぶ かいぼうがく だいにこうざ
#L1 2nd Department of Anatomy, Nagoya City University Medical School
#E2 植田／弘美
#F2 うえだ／ひろみ
#G2 Ueda/Hiromi
#J2 名古屋市立大学医学部解剖学第二講座
#K2 なごや しりつ だいがく いがくぶ かいぼうがく だいにこうざ
#L2 2nd Department of Anatomy, Nagoya City University Medical School
#E3 植田／高史
#F3 うえだ／たかし
#G3 Ueda/Takashi
#J3 名古屋市立大学医学部解剖学第二講座
#K3 なごや しりつ だいがく いがくぶ かいぼうがく だいにこうざ
#L3 2nd Department of Anatomy, Nagoya City University Medical School
#E4 平林／義章
#F4 ひらばやし／よしふみ
#G4 Hirabayashi/Yoshifumi
#J4 名古屋市立大学医学部解剖学第二講座
#K4 なごや しりつ だいがく いがくぶ かいぼうがく だいにこうざ
#L4 2nd Department of Anatomy, Nagoya City University Medical School
#E5 山田／和順
#F5 やまだ／かずより
#G5 Yamada/Kazuyori
#J5 名古屋市立大学医学部解剖学第二講座
#K5 なごや しりつ だいがく いがくぶ かいぼうがく だいにこうざ
#L5 2nd Department of Anatomy, Nagoya City University Medical School
#D 【目的】コロイド金粒子に銀増感（物理現像）を施すと、金粒子の表面には
金属銀が
 沈着するので、反応産物の大きさは本来の金粒子のものよりも増大する。これ
を利用
 して同一サイズのImmunogold (IG)を標識二次プローブとして用いる電顕免疫
二重
 染色法を開発した。
 【材料】0.25% glutaraldehyde-4% paraformaldehyde 液で固定したSD系雄
 ラットの膵組織をEpon包埋し、超薄切片を作製した。第一免疫染色にはインス
リン
 抗体、第二免疫染色にはグルカゴン抗体を使用し、IGにはprotein A-gold
(PAG)
 (粒子サイズ15 nm)を用いた。
 【方法】第一免疫染色ではインスリン抗体-PAGによる免疫染色を行った後、物
理現
 像(10-15分)を施した。次いでグルカゴン抗体-PAGによる第二免疫染色を行
い、後
 染色としてウラン-鉛染色を行った。
 【結果とまとめ】第一免疫染色の反応産物(金粒子)は現像による金属銀の沈着
によっ
 て粒子の大きさが増大しており、第二免疫染色の反応産物(15 nmの金粒子)と
の識別
 が容易であった。以上の結果から、銀増感法を利用することにより、一種の標
識二次
 プローブで二種の抗原の局在を検索する有用な電顕免疫二重染色が可能となっ
た。
#M Protein A-gold-silver染色法，電顕免疫二重染色，銀増感，ラット，
 ランゲルハンス島
#N Protein A-gold-silver staining method, double staining, electron
microscopy, rat, insular islet
#T Metallic silver grains precipitate on the surface of gold particles
in the
immunogold-silver staining, so that volume of each gold particle
becomes larger during the course of development. Applying this into
electron miscroscopic immunohistochemistry, we established an
efficient double staining method which consisted of a sequence of
protein A-gold - silver (first staining) and protein A-gold (second
staining) methods. Since reaction products of the first staining are
larger in size than those of the second staining in this method, both
can
be easily distinguished from each other.
#Last_modified 97.03.05-19:37
#Return_path fujimori@med.nagoya-cu.ac.jp
#Sequence_number   6
##End
JAA Home Page | Main Index | Thread Index